一、睪丸生殖細胞染色體畸變試驗
染色體型畸變:染色體結構損傷,表現為兩個染色單體的相同位點均出現斷裂或斷裂重接。
染色單體型畸變:染色體結構損傷,表現為染色單體斷裂或染色單體斷裂重接。
染色體數目畸變:染色體數目發生改變,不同于正常二倍體核型,包括整倍體和非整倍體。
二、試驗原理
通過適當的途徑使動物接觸受試物,一定時間后處死動物,動物處死前用細胞分裂中期阻斷劑處理,處死后制備睪丸初級精母細胞染色體標本,在顯微鏡下觀察染色體畸變。
本方法特別適用于需考慮體內代謝活化后的染色體畸變分析。
三、試劑
0.04%秋水仙素、1%檸檬酸三鈉、0.075mol/L 氯化鉀溶液、甲醇/冰醋酸固定液、60%冰乙酸、pH6.8 磷酸鹽緩沖液、姬姆薩染液、生理鹽水、甲醇。
四、測試方法
取材、低滲、固定、離心、滴片、染色、封片、閱片。在低倍鏡下按順序尋找背景清晰、分散良好、染色體收縮適中的中期分裂相,然后在油鏡下進行分析。每只動物至少分析 100 個中期分裂相的初級精母細胞。
所得各組染色體畸變率用 χ 2 檢驗,當各劑量組與陰性(溶劑)對照組相比,畸變細胞率有顯著性意義的增加,并有劑量-反應關系時;或僅一個劑量組有顯著性意義的增加,經重復試驗證實后,可判為試驗結果陽性。
五、周期
檢測項目 | 測試周期(工作日) |
睪丸生殖細胞染色體畸變試驗 | 73 |
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