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細胞周期檢測

細胞周期是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程。細胞周期由多個階段組成，通常包括G1期（DNA合成前期，細胞體積顯著增大）、S期（DNA合成期，包括蛋白合成 ）、G2期（DNA合成后期，大量合成RNA和蛋白質）、M期（有絲分裂和細胞分裂）以及GO期（細胞靜息休眠或執行生物學功能）。在細胞周期的不同時期，細胞核內的DNA含量存在差異。使用染料對DNA進行染色（如PI染料），可根據其熒光強度判斷細胞所處時期。

細胞凋亡檢測

細胞凋亡是指為維持內環境穩定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。AnnexinV是一種鈣依賴性的磷脂結合蛋白，能夠與（磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡稱PS）結合，磷脂酰絲氨酸主要分布在細胞膜內側，在細胞發生凋亡的早期，不同類型的細胞都會把磷脂酰絲氨酸外翻到細胞表面，即細胞膜外側，因此熒光標記的Annexin V可用于檢測暴露于早期凋亡細胞外部的PS。Annexin V還可以染壞死細胞，因為這些細胞的膜破裂，使Annexin V可以進入整個質膜，但是Annexin V就無法區分壞細胞死（中晚期凋亡細胞）和早期凋亡細胞。因此，通過與碘化丙啶（PI）共染色，可以將凋亡細胞與壞死細胞（中晚期凋亡細胞）區分開，因為早期凋亡細胞和活細胞的細胞膜仍然完整，PI能進入壞死細胞（中晚期凋亡細胞），但是被早期凋亡細胞排除在外。

左上象限Q1：此區域為壞死細胞。包含細胞碎片和機械損傷的細胞

右上象限Q2：此區域為晚期凋亡細胞

右下象限Q3：此區域為早期凋亡細胞

左下象限Q4：此區域為活細胞

細胞克隆形成試驗

細胞克隆形成實驗是用來檢測細胞增殖能力、侵襲性、對殺傷因素敏感性等項目的重要技術方法。單個細胞在體外連續6代以上，其后代所組成的細胞群稱為克隆或集落，通過計數克隆形成率，可對單個細胞的增殖潛力做定量分析，克隆形成率是反映細胞群體依賴性和增值能力的兩個重要性狀。

克隆根據培養介質不同分為平板克隆和軟瓊脂克隆，其中平板克隆形成實驗主要適用于貼壁生長的細胞，軟瓊脂克隆形成實驗常用于懸浮生長的細胞。

Control group                  Target group

細胞遷移試驗

細胞劃痕法是簡捷測定細胞遷移運動和修復能力的方法，類似體外傷口愈合模型，在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上，用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的*區域劃線，去除*部分細胞，然后繼續培養細胞至試驗設定時間，觀察周邊細胞是否遷移至*劃痕區，以此判斷細胞的生長遷移能力。試驗通常需設定對照組和供試品組，通過不同分組之間的細胞對于劃痕區修復能力的不同來計算遷移率可以判斷供試品遷移與修復能力。

對照組（牛I型膠原蛋白）：0h-24h-48h-72

實驗組（人重組膠原蛋白）：0h-24h-48h-72h

細胞毒性試驗

在電子耦合試劑存在時，WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物（formazan），其顏色的深淺與細胞增殖成正比，與細胞毒性成反比，對同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。使用酶標儀在450nm波長處測定OD值，可以間接反映活細胞的數量。用該方法可以準確快速判斷出供試品對目標細胞的半數致死量。

正常細胞                                           病變細胞(CPE)                            毒性細胞

由回歸方程 y=-10.02ln(x)+95.21 可得，當供試品能對一半細胞產生毒性，即 y=50%時，此時 x=91.05μg/mL。